在ELISA試劑盒測定時，受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。拋開品牌、價格來說。
選擇ELISA試劑盒首要考慮這幾個條件：
1、編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2、加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50?l。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40?l，然后再加待測樣品 10?l。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不 觸及孔壁，小鼠ELISA試劑盒輕輕晃動混勻。
3、溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4、配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
測定標(biāo)準(zhǔn)濃度的抗原ELISA試劑盒反應(yīng)的光密度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。測得待測樣品ELISA試劑盒反應(yīng)的光密度，從而查得抗原量。在標(biāo)記抗原競爭法中，定酶標(biāo)記抗原的酶活性為100%，在加入作為標(biāo)準(zhǔn)樣品的未標(biāo)記抗原后，以酶活性降低的百分率繪制曲線，從曲線上查得待測抗原的量。至于對抗體的定量，則要繪制出競爭抵制曲線。在制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時，需進(jìn)行空白對照測定，進(jìn)行校正。或者在測定時，將對照液作為零點測定點。
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