青海發(fā)光桿菌微生物在一個(gè)較寬的溫度范圍內(nèi)生長(zhǎng)。但是，要獲得高質(zhì)量的孢子，其zui適溫度區(qū)間很狹窄。一般來(lái)說(shuō)，提高培養(yǎng)溫度，可使菌體代謝活動(dòng)加快，縮短培養(yǎng)時(shí)間，但是，菌體的糖代謝和氮代謝的各種酶類，對(duì)溫度的敏感性是不同的。因此，培養(yǎng)溫度不同，菌的生理狀態(tài)也不同，如果不是用zui適溫度培養(yǎng)的孢子，其能力就會(huì)下降。不同的菌株要求的zui適溫度不同，需經(jīng)實(shí)踐考察確定。例如，龜裂鏈霉菌斜面zui適溫度為36.5～37 ℃，如果高于37 ℃，則孢子成熟早，易老化，接入發(fā)酵罐后，就會(huì)出現(xiàn)菌絲對(duì)糖、氮利用緩慢，氨基氮回升提前，發(fā)酵產(chǎn)量降低等現(xiàn)象。培養(yǎng)溫度控制低一些，則有利于孢子的形成。龜裂鏈霉菌斜面先放在36.5 ℃培養(yǎng)3天，再放在28.5 ℃培養(yǎng)1天，所得的孢子數(shù)量比在36.5 ℃培養(yǎng)4天所得的孢子數(shù)量增加3～7倍。 
青海發(fā)光桿菌斜面孢子培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)室的相對(duì)濕度對(duì)孢子形成的速度、數(shù)量和質(zhì)量有很大影響。空氣中相對(duì)濕度高時(shí)，培養(yǎng)基內(nèi)的水分蒸發(fā)少；相對(duì)濕度低時(shí)，培養(yǎng)基內(nèi)的水分蒸發(fā)多。例如，在我國(guó)北方干燥地區(qū)，冬季由于氣候干燥，空氣相對(duì)濕度偏低，斜面培養(yǎng)基內(nèi)的水分蒸發(fā)的快，致使斜面下部含有一定水分，而上部易干癟，這時(shí)孢子長(zhǎng)得快，且從斜面下部向上長(zhǎng)。夏季時(shí)空氣相對(duì)濕度高，斜面內(nèi)水分蒸發(fā)得慢，這時(shí)斜面孢子從上部往下長(zhǎng)，下部常因積存冷凝水，致使孢子生長(zhǎng)得慢或孢子不能生長(zhǎng)。試驗(yàn)表明，在一定條件下培養(yǎng)斜面孢子時(shí)，在北方相對(duì)濕度控制在40％～45％，而在南方相對(duì)濕度控制在35％～42％，所得孢子質(zhì)量較好。一般來(lái)說(shuō)，真菌對(duì)濕度要求偏高，而放線菌對(duì)濕度要求偏低。 
在培養(yǎng)箱培養(yǎng)時(shí)，如果相對(duì)濕度偏低，可放入盛水的平皿，提高培養(yǎng)箱內(nèi)的相對(duì)濕度，為了保證新鮮空氣的交換，培養(yǎng)箱每天宜開(kāi)啟幾次，以利于孢子生長(zhǎng)。現(xiàn)代化的培養(yǎng)箱是恒溫、恒濕，并可換氣，不用人工控制。 
青海發(fā)光桿菌zui適培養(yǎng)溫度和濕度是相對(duì)的，例如相對(duì)濕度、培養(yǎng)基組分不同，對(duì)微生物的zui適溫度會(huì)有影響。培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)基組分不同也會(huì)影響到微生物培養(yǎng)的zui適相對(duì)濕度。